嗜酸乳酸桿菌對過敏性鼻炎模型大鼠血清中組胺、IL-5、IL-12及組織中ＩＣＡＭ－１的影響

池海超，陳 覓，張 杰

［摘要］ 目的 探討嗜酸乳酸桿菌（ＬＢＡ）對過敏性鼻炎模型大鼠血清中組胺、白細(xì)胞介 素（ＩＬ）－５、ＩＬ－１２及組織中細(xì)胞黏附因子－１（ＩＣＡＭ－１）的影響。方法 ４８只雄性ＳＤ 大鼠隨機(jī)分為對照組、模 型 組、ＬＢＡ 組（１×１０１０ＣＵＦ／ｋｇ）、氯 雷 他 定（ＬＲＤ）組（５ｍｇ／ｋｇ），每組１２只；ＬＢＡ 組每天灌胃１次，共６周；ＬＲＤ組每天灌胃１次，共７ｄ。對大鼠臨床癥狀進(jìn)行評分，并檢測血清中組胺、ＩＬ－５、ＩＬ－１２的水平，鼻黏膜組織ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ 及蛋白的表達(dá)，觀察組織病理改變。結(jié) 果 ＬＢＡ 能 顯 著 改 善 ＡＲ 模 型 大 鼠 癥 狀評分，組織病理評分，改善 ＡＲ引起的鼻癢、噴嚏、清涕等 癥 狀；降 低 血 清 組 胺、ＩＬ－５水 平，組 織ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ 及 蛋 白 表 達(dá)，提 高血清ＩＬ－１２水平，對 ＡＲ有顯著治療作用。結(jié) 論 長 期（６周）給 予 ＬＢＡ 治療可降低血清組 胺、ＩＬ－５水 平 及 組 織 中ＩＣＭＡ－１的 表達(dá)，提高血清ＩＬ－１２水平對 ＡＲ發(fā)揮治療作用。

［關(guān)鍵詞］ 過敏性鼻炎；白細(xì)胞介素－５；白細(xì)胞介素－１２；細(xì)胞黏附因子－１

［中圖分類號］ Ｒ２８５．５

［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］ Ａ

［文章編號］ １６７１－８３４８（２０１５）３１－４３７９－０３

過敏性鼻 炎（ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ＡＲ）是呼吸系統(tǒng)常見的、多發(fā)的一種疾病，不僅嚴(yán)重地危害了人們身體健康而且容易誘發(fā)多種疾病［１］。ＡＲ主要是患者吸入變應(yīng)原，炎癥介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致鼻黏膜發(fā)生炎 癥［２］。同時(shí)發(fā)病原因也和體質(zhì)、遺 傳、免 疫等因素息息相關(guān)３］。ＡＲ 的臨床表現(xiàn)主要有鼻塞、流 鼻 涕、鼻癢、打噴嚏及嗅覺功能障礙等。此 外，它還可能導(dǎo)致或并發(fā)鼻竇炎、鼻息肉、咽炎、中耳炎、氣管和支氣管炎、哮喘和變應(yīng)性眼結(jié)膜炎等 疾 病，嚴(yán) 重 影 響 人 們 的 睡 眠、學(xué) 習(xí)、工 作 及 生 活 質(zhì)量［４－５］。ＡＲ主要通過藥物 進(jìn) 行 治 療，存在安全性方面的問題，同時(shí)伴發(fā)較多不良反應(yīng)［６］。有研究證明嗜酸乳酸桿菌（ｌａｃｔｏ－ｂａ－ｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ，ＬＢＡ）能夠通過調(diào)劑免疫反應(yīng)預(yù)防或減輕過敏性癥狀，對臨床上 ＡＲ的防治有深遠(yuǎn)意義［７－８］。但免疫調(diào)節(jié)機(jī)制尚未十分清楚，本研究擬建立 ＡＲ大鼠模型，通過乳酸桿菌對模型大鼠組織中ＩＣＡＭ－１及血清中組胺、白細(xì)胞介素（ＩＬ）－５、ＩＬ－１２的影響，探討乳酸桿菌對 ＡＲ大鼠免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制。

１ 材料與方法

１．１ 實(shí)驗(yàn) 動 物、主要儀器及試劑 ＳＰＦ 級 雄 性 ＳＤ 大 鼠 ４８只，揚(yáng)州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，體質(zhì)量２００～２２０ｇ。ＬＢＡ 濃縮凍干粉，有效活菌數(shù) 大 于 或 等 于１００億 個／ｇ，購 自 廣 東 金 辛醫(yī)藥科技有限公司。卵 清 蛋 白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）購 自 上 海 化學(xué)試劑廠。氯 雷 他 定 片（ｂｏｒａｔａｄｉｎｅｔａｂｌｅｔｓ，ＬＲＤ）１０ｍｇ／片，購自上海先靈葆雅制藥有限公司。氫 氧 化 鋁［Ａｌ（ＯＨ）３］購 自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；組胺、白細(xì)胞介素－５（ＩＬ－５）、ＩＬ－１２試劑盒購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司；Ｔｒｉｚｏｌ試 劑、逆 轉(zhuǎn) 錄試劑盒、Ｔａｑ酶、上下游引物由上海生工生物科技有限公司生產(chǎn)或合成。ＢＣＡ 蛋白濃度測定盒購自杭州碧云天生物技術(shù)研究所；ＩＣＡＭ－１一抗、山羊抗大鼠二抗、ＥＣＬ發(fā)光顯色液購自美國 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司。其他試劑均為分析純。

１．２ 分組及造模 將４８只雄性ＳＤ大鼠分為４組：對照組、模型組、ＬＢＡ 組、氯雷他定（ＬＲＤ）組，每組１２只。ＬＢＡ 組每天按照２ｍＬ／ｋｇ灌服配制好的 ＬＢＡ 混懸液；對 照 組、模 型 組、ＬＲＤ組每天灌服等量生理鹽水，連 續(xù) 灌 服３周。第４周，按 照 參 考文獻(xiàn)方 法［８］，具 體 方 法 為：模 型 組、ＬＢＡ 組、ＬＲＤ 組 大 鼠 以ＯＶＡ１０ｍｇ、Ａｌ（ＯＨ）３３０ｍｇ及生理鹽水１ｍＬ混合后腹腔注重慶醫(yī)學(xué)２０１５年１１月第４４卷第３１期 ９７３４射，隔天１次，連續(xù)７次，進(jìn) 行 初 次 免 疫；第１５天 進(jìn) 行 激 發(fā)，每天給予５％ ＯＶＡ２０μｇ滴鼻／側(cè)和１％ＯＶＡ 噴霧 吸 入５ｍｉｎ，連續(xù)７ｄ。對照組同期使用無菌生理鹽水進(jìn)行假致敏及假激發(fā)。

１．３ 給藥方法 ＬＢＡ 組按照２ｍＬ／ｋｇ大鼠體質(zhì)量 灌 服 配 制好的 ＬＢＡ 混懸液，造模期間同時(shí)給藥直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束；ＬＲＤ 組于造模激發(fā)每天滴鼻前按照５ｍｇ／ｋｇ大鼠體質(zhì)量灌服生理鹽水溶解的 ＬＲＤ，每天１次，連 續(xù) 給 藥７ｄ。對照組與模型組灌服等體積生理鹽水。