桂花多糖體外免疫活性的研究
尹 偉， 陶阿麗， 戴 一， 施伶俐， 張國升
（安徽新華學(xué)院 藥學(xué)院， 安徽 合肥 230088）

摘 要：目的：探討桂花多糖對小鼠體外免疫活性功能作用的影響；方法：通過制備小鼠脾淋巴細(xì)胞，測定桂花多糖對脾淋巴細(xì)胞的毒性和增殖效果，并檢測桂花多糖對 IL-2、IFN-γ 及 TNF-α 等細(xì)胞因子的水平的影響.結(jié)果：桂花多糖 1μg/ml、10μg/ml 及 100μg/ml 的OD570nm 值分別為(0.264±0.04)、(0.341±0.01)、(0.502±0.02)，顯著優(yōu)于陰性對照組的數(shù)值(0.113±0.02)，表明桂花多糖對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增值，效果明顯，無顯著細(xì)胞毒性.桂花多糖實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞因子濃度顯著優(yōu)于對照組，顯示了桂花多糖對 Con A 誘導(dǎo)的細(xì)胞因子(IL-2、IFN-γ、TNF-α)分泌促進(jìn)*，同時(shí)與劑量大小在一定范圍內(nèi)，保持一定的正相關(guān).結(jié)論：桂花多糖無顯著的細(xì)胞毒性，對淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)的增殖轉(zhuǎn)化效果明顯，并且對 IL-2、IFN-γ、TNF-α 的分泌有很強(qiáng)的促進(jìn)作用。
關(guān)鍵詞：桂花多糖；體外免疫；細(xì)胞因子；IL-2；IFN-γ；TNF-α
中圖分類號：R979.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1673-260X（2015）11-0016-03

多糖作為天然生物體大分子物質(zhì)，具有多種多樣的生物活性，如增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗氧化作用，并在抗腫瘤方面發(fā)揮著重要的生物活性作用.據(jù)報(bào)道[1]，植物多糖的免疫調(diào)節(jié)作用可能是通過激活機(jī)體免疫細(xì)胞活性，以促進(jìn)這些細(xì)胞 對 IL-2、IFN-γ、TNF-α 等細(xì)胞因子的分泌，從而產(chǎn)生一定的免疫調(diào)節(jié)作用.亦有報(bào)道表明[2]，植物多糖的這些免疫作用可能與抗腫瘤作用密切相關(guān).目前報(bào)道較多的植物多糖，如半夏多糖、青蒿多糖等均具有調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞免疫功能以及抑制腫瘤細(xì)胞作用[3].桂花(Osmanthus fragrans Lour.)，為木犀科木犀屬植物，是木犀科常綠灌木或小喬木.《本草綱目》記載：桂花，味甘、辛，性溫，能暖胃、益胃、驅(qū)寒，并具有疏肝理氣、祛痰止咳和順肺開胃的功效[4].現(xiàn)代研究表明[5]，桂花具有降血糖、抗炎、抑菌、體內(nèi)外抗氧化和清除自由基等生物活性.桂花多糖是桂花的重要成分之一，但是目前對桂花的研究主要集中在桂花精油方面，而對桂花多糖的免疫活性則尚未見報(bào)道。
本課題在前期研究的基礎(chǔ)之上，擬使用前期得到的桂花多糖作為原料，考察桂花多糖的體外免疫活性，旨在為臨床新藥研發(fā)提供一定的參考.具體報(bào)道如下：
1 材料
1.1 主要試劑
二甲基亞砜 (DMSO，上海市欣誠試劑有限公司)；RPMI-1640 (上海元龍生物技術(shù)有限公司)；胎牛血清(江蘇澤雨生物科技有限公司)；刀豆蛋白 A(Con A，上海豐壽生物科技有限公司)；MTT (噻唑藍(lán)，上海豐壽生物科技有限公司)；臺盼藍(lán)(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)
1.2 主要儀器

CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱 (上海百典儀器廠)；HZS-H 水浴振蕩器(金壇市精達(dá)儀器有限公司)；96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板 (上海研拓生物科技有限公司)；550 型酶標(biāo)儀(無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司)

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
SPF 級昆明種小鼠，購自安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號：SCXK ( 皖)2011-002 號.
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