苯丙氨酸檢測試劑盒（本公司可用Elisa法測定含量）

【產品名稱】
    通用名稱：苯丙氨酸檢測試劑盒（細菌抑制法）    英文名稱： Phenylalanine Kit（BIA）

【包裝規格】    96人份/盒  

【預期用途】
    用于檢測采集在S&S 903# 濾紙上的新生兒血樣品中苯丙氨酸的含量。適用于新生兒苯丙酮尿癥（PKU）的篩查，僅用于體外檢測。
    苯丙酮尿癥（簡稱PKU）是一種較常見的常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝病，發病率約1/10,000。本病可因苯丙氨酸羥化酶缺乏引起，也可因輔酶因子BH4缺陷引起。這些缺陷致使苯丙氨酸不能被轉化為酪氨酸，導致大量的苯丙氨酸及其代謝產物在體內堆積，引起中樞神經系統損害。其臨床主要表現為：發育遲緩，毛發、皮膚及虹膜變淺，癲癇，進行性智力低下等。由于本病的早期發現早期治療，對患兒的生長發育、智力發育不受影響，因此被我國列為新生兒疾病篩查項目之一。檢測方法還有熒光法、酶法等。 【檢驗原理】
    枯草桿菌在含有抑制劑的培養基中生長受到抑制，而當外界提供苯丙氨酸環境時，抑制作用解除，枯草桿菌即可恢復生長且細菌生長環的直徑與苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制備好的培養基上，放上濾紙干血片，血中的苯丙氨酸會擴散到周圍培養基中，被抑制的枯草桿菌即可恢復生長。用被檢樣品的菌環直徑與標準品的菌環直徑相比，得出樣品中苯丙氨酸的含量。 
 【主要組成成分】
    苯丙氨酸篩查試劑盒（細菌抑制法）組成表
名稱
96人份/盒
包裝
瓊脂糖粉 （瓊脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶
無色透明玻璃瓶
營養液（氨基酸、磷酸鹽緩沖液等）10ml/瓶
青霉素酶（青霉素酶、生理鹽水）0.3ml/瓶抑制劑（β-2-噻吩丙氨酸）1.0ml/瓶
菌株孢子懸液（枯草桿菌）0.2ml/瓶
一次性培養皿（透明聚苯乙烯）1塊
無色透明塑料袋
標準血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸)
1份
質控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸)1份

  說明書1份

    注*：標準品或質控品的濃度若有改變，將在試劑盒內放通知單，同時通知。

 【儲存條件及有效期】
    儲存條件2℃～8℃,防止冷凍。
    有效期６個月，試劑盒開啟后一次性使用。

【適用機型】
    無需儀器檢測。

【樣本要求】
    按照衛生部規定的“新生兒采血常規"采取足跟血。

【檢驗方法】
    1.瓊脂液配制：將瓊脂糖倒入三角燒瓶中，加入100ml雙蒸水（7日內）加熱煮沸（建議沸騰三次）至*溶解，（燒瓶中放入一支溫度計監控溫度）；
    2.混合液配制：將青霉素酶、抑制劑、菌株孢子懸液加入到營養液瓶中，充分混勻備用；    3.當瓊脂糖液的溫度降至55℃～60℃時，將混合液全部倒入瓊脂糖液中，充分混勻后（避免產生氣泡）快速倒入一次性培養皿中，使其成為厚薄均勻、平整光潔的薄層（厚度約３mm），待冷卻后備用；
    4.用直徑3mm打孔器分別打取標準血片、質控血片和待檢血片，按照加樣模板所示排列在培養皿上，將培養皿倒置放入37±℃0.5℃恒溫箱中培養16-18小時；
    5.菌環量取：在菌環zui致密處分別量取標準血片、質控血片和待檢血片細菌生長環的直徑，將待檢血片的細菌生長環直徑與標準品相比較，可得出待檢血片的苯丙氨酸含量。   標準品菌環范圍：
    2 mg/dl時菌環直徑為 0.75-1.05cm；4 mg/dl時菌環直徑為 1.25-.155cm；    8 mg/dl時菌環直徑為 1.55-1.85cm；20 mg/dl時菌環直徑為2.05-2.35cm；  質控品菌環范圍：
    陰性質控菌環直徑應 ＜2mg/dl濃度點的直徑；    陽性質控菌環直徑應 ＞4mg/dl濃度點的直徑。 【參考值（參考范圍）】    參考值< 4mg/dl

【檢驗結果的解釋】
    1. 苯丙氨酸含量≥4mg/dl為可疑陽性，原血片復查，苯丙氨酸含量仍≥4mg/dl，即召回復查；
    2. 檢測結果本身不能成為治療的惟一因素。必須與其他的臨床觀察和診斷試驗相結合；    3. 質控品的結果必須控制在試劑盒要求范圍之內，否則實驗結果可視為無效。 

【檢驗方法的局限性】
    1.應使用新生兒篩查S&S 903#濾紙采集血斑。使用其他濾紙結果將不同；    2.采血時間為出生后72小時，并充分哺乳6次以上，否則會導致假陰性結果。  

【產品性能指標】
    1. 標準品濃度范圍：2-20 mg/dl.；    2. 批內精密度：CV不大于10 %

    3. 批間精密度：CV不大于12 %；    4. 準確性：回收率為100～125％；    5. 靈敏度：小于1mg/dl.；
    6. 特異性：與酪氨酸、色氨酸無交叉反應。

【注意事項】
    1. 本試劑盒為一次性使用產品；不同批號試劑不可混用；超出效期不可使用；僅用于體外檢測；      
    2.．所有試劑、樣本應視為有潛在的傳染源，實驗結束應采用高壓或消毒液浸泡處理。  

【參考文獻】
   上海恒遠生物科技有限公司技術部資料分析